一文為大家介紹純化柱的正確維護方法
點擊次數:2473 更新時間:2021-08-20
純化柱采用硅膠膜作為核酸的特異性吸附材料,而對其他生物材料基本不吸附,可以保障大程度地回收樣品中的DNA\RNA,同時去除其他雜質。可以用于各種材料的DNA\RNA的提取以及精制,具有操作簡單、回收率高、性能穩定等特點。
下面咱們來了解下純化柱的正確維護方法:
1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使其從高處掉下都會影響柱內的填充狀況。柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
2、應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變為全部是水,反之亦然。
3、一般說來不能反沖,只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。
4、選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠"飽和",避免分析柱中的硅膠基質被溶解。
5、避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和本產品之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱,可以而且應該經常更換。
6、經常用強溶劑沖洗,清除保留在柱內的雜質。在進行清洗時,對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規分析需要50~75ml。
7、保存時應將柱內充滿甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。
8、使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時應更換濾片或將其取出進行清洗;另一種可能是大分子進入柱內,使柱頭被污染。如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現塌陷,死體積增大。
希望上述內容能夠幫助大家更好的了解本產品。